Основные принципы диагностики аллергических заболеваний. Диагностика аллергии — методы обнаружения Современные методы диагностики и лечения аллергических заболеваний

Сбор аллергологического анамнеза

Клинико-лабораторное обследование - проводится с целью уточнения нозологии, установления локализации процесса и фазы заболевания. Включает осмотр пациента, общий анализ крови, анализ мокроты, носового секрета, рентгенографию грудной клетки и околоносовых пазух.

Аллергологическое обследование включает:

– кожные пробы,

– провокационные тесты,

– лабораторные исследования (определение содержания общего и аллергенспецефического IgE, реакция дегрануляции тучных клеток (прямая и непрямая), тест на эозинофильный катионный белок (ECP), выявление специфических антител, определение циркулирующих иммунных комплексов и их отложений в пораженных органах, проведение реакции бластной трансформации на соответствующий антиген).

Основные принципы лечения аллергических заболеваний

Этиотропный - заключается в устранении или предотвращение контакта организма с аллергеном.

Патогенетический - методы, приводящие в конечном итоге к состоянию гипо- или десенсибилизации организма. Это состояние достигается путем формирования толерантности к аллергену, снижения продукции антител и медиаторов аллергии, их разрушения и выведения.

Аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ) - введение препарата вызывающего аллергическую реакцию через небольшие промежутки времени в течение нескольких часов в нарастающей дозе. Проводится только в условиях стационара.

Неспецифическая терапия заключается в применении антигистаминных препаратов, иммунодепрессантов, мембраностабилизаторов.

Симптоматическая терапия - предотвращение, устранение неприятных, тягостных ощущений у пациента. Применяют отвлекающую терапию, сеансы внушения, обезболивающие, седативные и психотропные средства.

Саногенетическая терапия - активация адаптивных реакций и процессов (в том числе реперационно-регенеративных). Для этого используются фитоадаптогены, микроэлементы, витамины, энзимы и другие лекарственные средства. Немедикаментозное воздействие заключается в использовании лечебного питания или голодания, закаливания и психотерапии.

Основные принципы профилактики аллергических заболеваний

Первичная - предупреждение возникновения аллергического заболевания, путем предотвращения или ограничения контакта с аллергеном.

Вторичная - ранняя диагностика и адекватное лечение возникшего аллергического заболевания, что способно в дальнейшем повлиять на возникновение других форм аллергий в более позднем возрасте.

Третичная – профилактика повторных обострений аллергического заболевания, чему способствует адекватное и своевременное лечение возникших обострений.

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ТОЛЕРАНТНОСТЬ - состояние приобретенной специфической ареактивности к антигену.

Виды иммунологической толерантности:

Полная - состояние ареактивности охватывает все лимфоциты, способные реагировать на данный антиген

Частичная - состояние ареактивности охватывает только часть лимфоцитов, способных реагировать на данный антиген.

Естественная - толерантность к своим антигенам.

Приобретенная - искусственно индуцируемая толерантность к чужеродному антигену.

Механизмы поддержания иммунологической аутотолерантности

Центральные - формируются в процессе лимфопоэза в центральных лимфоидных органах - тимусе и костном мозге.

Клональная делеция - гибель путем апоптоза в тимусе и красном костном мозге Т- и В-лимфоцитов, имеющих рецепторы к аутоантигенам.

Клональная анергия - ареактивность лимфоцитов, имеющих В-клеточные рецепторы к растворенным аутоантигенам в низких концентрациях. После контакта с антигеном лимфоцит сохраняет жизнеспособность, отвечает пролиферацией на неспецифические сигналы (IL-2), но не на сигналы, поступающие с антиген-специфических рецепторов, - клетки функционально не активны.

Периферические - формируются на этапе иммуногенеза в периферических органах и тканях в отношении Т- и В-лимфоцитов избежавших негативной селекции в центральных органах иммунной системы.

Т-клеточная иммуносупрессия - периферические аутореактивные лимфоциты подвергаютсяапоптозу или становятсяанергичными вследствие супрессивного влияния цитокинов профиляTh2 (Т-хелперов 2).

Основные причины отмены естественной иммунологической толерантности.

– Нарушение элиминации аутореактивных Т- и В-клеток

– Повреждение гистогематических барьеров и попадание антигенов забарьерных органов в кровоток.

– Аутоиммунизация вследствие существования перекрестно-реагирующих антигенов.

– Ослабление гуморальных супрессорных механизмов сдерживающих иммунный ответ и обеспечивающих его прекращение после элиминации антигена.

– Генетическая предрасположенность

– Аутоиммунизация организма матери клетками плода во время нормальной беременности (гипотеза зародышевых клеток).

АУТОИММУННЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ - это заболевания обусловленные образованием аутоантител и аутореактивных лимфоцитов против собственных тканей организма.

Аутоантигены: «секвестрированные», обычные, модифицированные

Прежде чем начать лечение заболевания аллергологического характера, проводится диагностика аллергии, направленная на точное установление аллергена, вызывающего негативную реакцию. Как правило, анализ на выявление аллергена проводится путем кожных проб, специальных (провокационных) тестов, а также методом иммунологических лабораторных исследований. Здесь вы можете ознакомиться с подробным обзором всех вышеперечисленных методов диагностики аллергических заболеваний и особенностями их проведения.

Диагностика аллергических заболеваний: прямые и косвенные признаки

Первый и крайне важный этап диагностики аллергических заболеваний - правильно собранная история болезни. Данные, которые пациент сообщает врачу во время первого приема, позволяют направить дальнейшее аллергологическое обследование в нужном направлении.

Существуют прямые и косвенные признаки, указывающие на чувствительность к аллергенам. Например, прямой признак бытовой аллергии - появление клинических признаков заболевания во время уборки помещения, во время игры с мягкими игрушками, при посещении цирка или зоопарка и так далее. Косвенные признаки бытовой аллергии - частые обострения заболевания дома, проявление симптомов чаще ночью в постели, а не на улице при прогулке.

К прямым признакам пыльцевой аллергии относится появление заболевания (или усиление признаков заболевания) при контакте с цветущими растениями, использовании парфюмерии с цветочной пыльцой, применении средств фитотерапии. Косвенно на пыльцевую аллергию могут указывать обострения в весенне-летне-осенний период, появление реакции при употреблении в пищу меда, орехов, яблок, груш, слив.

Структура аллергенов (при IGE-зависимых аллергических реакциях) выглядит следующим образом.

Выработку IgE могут вызвать аллергены белковой природы или комплекс белка с углеводом. Полисахариды не способны сами вызывать стимуляцию образования IgE.

По молекулярной массе и иммуногенности антигены делятся на две группы: полные антигены и гаптены.

К полным антигенам относятся антигены пыльцы, эпидермиса, сыворотки животных и другие. Они способны самостоятельно вызвать синтез IgE антител. Основу полного антигена составляет полипептидная цепь.

Неполные антигены, или гаптены, - низкомолекулярные вещества, сами по себе не являются аллергенами. Попадая в организм, гаптены образуют комплекс с тканевыми или сывороточными белками, и уже этот комплекс выступает в роли аллергена.

Различия между полными антигенами и гаптенами имеют принципиальное значение в диагностике аллергических заболеваний. Полные антигены можно идентифицировать с помощью диагностических препаратов при кожном тестировании. Однако определить гаптен и изготовить на его основе диагностический препарат практически невозможно (исключение составляют только пенициллины).

Выявлению аллергенов способствуют кожные пробы, провокационные тесты, лабораторные анализы.

Как выявить аллерген: лабораторный тест на аллергическую реакцию

Лабораторные иммунологические тесты. Наиболее отработанный аллергический тест, проводимый в лабораторных условиях, - это определение аллерген-специфических IgE антител в сыворотке крови. Лабораторные методы могут лишь установить наличие какого-либо звена аллергического процесса, но не отражают картину в целом. Тест на аллергическую реакцию - это результат одновременного участия всех составляющих сложного механизма иммунологического процесса. Он принципиально не может быть получен в лабораторных условиях, поэтому тесты используются как вспомогательный, хотя и важный, инструмент диагностики и не могут заменить проведение испытаний на самом больном.

Как проводят тест на аллергию: кожные пробы

Кожные пробы. В диагностике большинства аллергических заболеваний используется постановка кожных диагностических проб.

Кожные пробы на аллергены малоинформативны при обширном поражении кожи. Для диагностики лекарственной аллергии кожное тестирование используется крайне редко, поскольку обычно аллергию вызывает не сам препарат, а его метаболиты, определить которые невозможно. Из лекарств кожные пробы проводятся только с белковыми аллергенами - например, с инсулином, сыворотками и пенициллинами.

Помимо местной реакции при проведении кожных проб могут возникнуть и общие реакции, как правило, через 10-180 минут после тестирования. Наличие общих реакций служит надежным доказательством чувствительности организма к аллергену.

Перед тем как выявить аллерген, медики обязательно учитывают особенности проведения кожных проб:

• Кожное тестирование проводят только в период ремиссии заболевания.
• Кожное тестирование целесообразно выполнять не ранее чем через 3-4 недели после системной аллергической реакции.
• Все виды кожных проб могут дать системную реакцию в виде анафилактического шока или обострения со стороны шокового органа.
• Перед кожным тестированием на аллергию следует заранее отменить прием антигистаминных препаратов, причем срок отмены во многом зависит от вида препарата.

Среди кожных проб выделяют аппликационные пробы, тест уколом (прик-тест), скарификационные и внутрикожные пробы.

Проведение скарификационных кожных проб

Скарификационные кожные пробы применяют при подозрении на сенисбилизацию к пыли (домашние клещи), пыльце, эпидермальным аллергенам и пище. Из всех видов кожных проб именно этот вид диагностики аллергии наиболее распространен в России.

Как проводят такие тесты на аллергию в амбулаторных условиях? При проведении скарификационных проб на кожу предплечья капают водные растворы различных аллергенов (пылевых, пыльцевых, пищевых) на некотором расстоянии друг от друга. В местах нанесения капель слегка повреждают кожу, не затрагивая кровеносных сосудов. Через 10 минут капли удаляют, а еще через 10 минут проверяют, не появились ли эритема (сильное покраснение) и волдырь.

Такие тесты довольно чувствительны, а техника их проведения менее стандартизована, чем проба уколом. Поэтому предпочтительнее проведение прик-теста.

Прик-тест, конъюнктивальный и назальный тесты для диагностики аллергии

Прик-тест - это метод диагностики аллергий путем прокола кожи через каплю раствора аллергена. Прокол должен быть достаточным по глубине, но не до крови. Оценку реакции проводят через 20 минут. Прик-тест редко дает ложноположительные реакции.

Конъюнктивальный тест - это проба на аллергию путем закапывания разведенного аллергена в глазную щель. Она проводится при подозрении на аллергический конъюнктивит. Проводится крайне редко в связи с непредсказуемой возможной тяжелой реакцией со стороны глаз.

Назальный провокационный тест - это аллергическое тестирование, которое проводится при подозрении на аллергический ринит. В носовой ход последовательно, через каждые 15-20 минут, закапывают несколько капель аллергена в возрастающих концентрациях (от 1/100000 до 1/10).

Аппликационное аллергическое тестирование

Аппликационные кожные тесты (патч-тесты) – это тест для диагностики аллергии, который используется при подозрении на контактный аллергический дерматит и фотоаллергические реакции. В последние годы обсуждается возможность их использования у больных атопическим дерматитом. Тесты проводятся на незатронутых повреждением участках кожи. Тест-аллергенами чаще всего служат различные химические вещества, в том числе и лекарства. Их применяют в чистом виде или в растворах в концентрациях, не вызывающих раздражения кожи у здоровых людей.

Для постановки и оценки кожных тестов требуется 3-4 визита больного к врачу. В первый раз осуществляется нанесение аллергена на кожу. Обычно раствором аллергена смачивают кусочек марли и закрепляют его на коже предплечья, живота или спины. Результаты оценивают через 20 минут, 5-6 часов и 1-2 суток. Если на месте аппликации аллергена возникло выраженное жжение и зуд, пациент должен обратиться к врачу. В этом случае лоскут снимают раньше. Реакцию оценивают, пользуясь специальной шкалой.

Анализ на выявление аллергена проведением внутрикожных и провокационных проб

Внутрикожные пробы (подкожные инъекции аллергена) почти не используются в диагностике. Проведение внутрикожных проб проводится очень редко из-за высокого риска системной реакции.

Провокационные пробы – это тестирование на аллергию методом выявления сенсибилизации (чувствительности), основанное на непосредственном введении аллергена в орган-мишень. Наиболее достоверный метод аллергологической диагностики, однако, и наиболее опасный. Предсказать реакцию больного на провокацию невозможно, поэтому требуется наличие строгих показаний для ее проведения. Так же как и кожные пробы, с аллергенами, провокационные пробы могут проводиться только в период полной ремиссии заболевания. По способу введения аллергена различают назальные, конъюнктивальные и ингаляционные провокационные пробы. У больных с пищевой аллергией подозреваемый пищевой продукт дается больному через рот.

Основное преимущество провокационных проб перед кожными, заключается в большей достоверности результатов. Недостатки же - в повышенном риске тяжелых аллергических реакций, сложность с количественной оценкой результатов. Кроме того, в один день можно провести пробу только с одним аллергеном.

Диагностика аллергических заболеваний может быть разделена на пять этапов:

• Сбор аллергологического анамнеза;
• Проведение клинико-лабораторного обследования;
• Проведение кожных аллергических проб;
• Провокационные тесты;
• Иммунологическое обследование.

Первый этап – сбор аллергологического анамнеза.

Правильно собранный аллергологический анамнез имеет важное диагностическое значение.

При сборе аллергологического анамнеза ставятся следующие задачи (Р. Я. Мешкова и соавт.):

1.Установление аллергической природы заболевания, нозологической формы;

2.Предположительное выявление этиологически значимого аллергена;

3.Определение факторов риска, способствующих развитию аллергического заболевания:

• наследственной предрасположенности;
• влияния окружающей среды;
• климата, погоды, физических факторов, сезонности;

4.Выявление сопутствующей патологии;

5.Выявление имеющихся у больного других аллергических заболеваний;

6.Влияние бытовых факторов (скученность, домашние животные, птицы, сырость в помещении, мягкая мебель, ковры и т. д.);

7.Установление связи обострений с другими заболеваниями (органов пищеварения, эндокринной системы, центральной нервной системы);

8.Влияние профессиональных вредностей;

9.Установление связи заболевания с приемом пищи;

10.Оценка клинического эффекта от применения антиаллергических средств и (или) элиминации аллергена.

Второй этап – клинико-лабораторное обследование.

Проводят осмотр больного и назначают исследование крови, мочи, носового секрета, мокроты, рентген грудной клетки, приносовых пазух, определяют наличие и степень обструкции дыхательных путей.

По результатам второго этапа можно установить:

• Локализацию процесса (нос, глаза, кожа, бронхи, ЖКТ);
• Нозологию (поллиноз, бронхиальная астма, дерматит);
• Фазу заболевания (острая фаза или ремиссия).

Третий этап – проведение кожных аллергических проб.

• Выделяют следующие виды кожных проб (Р. Я. Мешкова и соавт.):
• Накожные (капельные, аппликационные и др.);
• Скарификационные;
• Тест-уколом (prik-тест);
• Внутрикожные.

Выбор вида кожной пробы зависит от предполагаемой этиологии заболевания, степени сенсибилизации больного.

Показаниями для проведения кожных проб являются данные анамнеза, указывающие на роль того или иного аллергена или группы аллергенов в генезе заболевания.

Противопоказаниями для кожного тестирования являются:

1. Острая фаза аллергического заболевания;
2. Обострение сопутствующих хронических заболеваний;
3. Острые интеркурентные инфекционные заболевания;
4. Туберкулез и вираж туберкулиновых проб;
5. Декомпенсированные состояния при болезнях сердца, печени, почек;
6. Заболевания крови, онкологические, системные и аутоиммунные заболевания;
7. Период лечения антигистаминными препаратами и мембранностабилизаторами, гормонами, бронхоспазмолитиками;
8. Судорожный синдром, нервные и психические болезни;
9. Беременность, кормление ребенка грудью, первые 2-3 дня менструального цикла;
10. Возраст до 3 лет;
11. Анафилактический шок, синдромы Лайела и Стивенса – Джонсона в анамнезе.

I. Накожные пробы. Капельная проба. Используется при высокой сенсибилизации, особенно к химическим веществам и иногда к лекарственным средствам.

Техника постановки: на обезжиренную сгибательную поверхность кожи предплечья наносят каплю аллергена и параллельно, в качестве контроля – каплю растворителя. Оценивают через 20 мин. Аппликационная проба. Используется для диагностики профессиональной аллергии, контактных дерматитов.

Техника постановки: на сгибательную поверхность кожи предплечья, предварительно обработанную 70° спиртом, накладывают марлечку, смоченную в растворе аллергена и, параллельно, марлечку с растворителем. Оценивают через 30 мин.

II. Скарификационные кожные пробы. С их помощью выявляют причинно значимый аллерген и степень сенсибилизации к нему. Их проводят со всеми инфекционными аллергенами. Считается, что одновременно можно ставить не более 10-15 проб.

Техника постановки: кожу сгибательной поверхности предплечья обрабатывают 70° спиртом, затем наносят отдельными шприцами по капле гистамина 0,01%, аллергенов и тестконтрольной жидкости на расстоянии 4-5 см друг от друга. Стерильными скарификаторами проводят отдельно через каждую каплю по 2 параллельные царапины длиной 4-5 мм и расстоянием между ними 2 мм. Детям до 5 лет можно проводить по одной царапине.

Царапины проводят поверхностно, нарушая только целостность эпидермиса, не травмируя кровеносные сосуды. Через 10 мин осторожно промокают каждую каплю отдельным ватным тампоном, еще через 10 мин оценивают пробы.

Обязательным условием является отрицательный результат с тестконтрольной жидкостью и положительный – с гистамином.

При оценке скарификационного кожного тестирования следует учитывать возможность появления ложноположительной реакции:

• на тестконтрольную жидкость при повышенной чувствительности кожных покровов кмеханическому воздействию, а также в случае возникновения реакции на компоненты,входящие в тестконтрольную жидкость (например, фенол);
• на аллергены – при нарушении техники постановки кожного тестирования (глубоко) и (или) повышенной индивидуальной чувствительности кожных покровов к механическому воздействию.

Ложноотрицательные реакции возможны:

• на гистамин – при снижении индивидуальной чувствительности к гистамину или припроведении кожного тестирования в период лечения антигистаминными или гормональ ными препаратами;
• на аллергены – при отсутствии полного серийного набора аллергенов одного типа (например, домашней пыли); неправильном хранении аллергенов, нарушении техники введения аллергена (очень поверхностно), проведении кожного тестирования на фоне обострения аллергического или тяжелого соматического заболевания, приеме лекарственных средств (антигистаминных препаратов, мембраностабилизаторов, гормонов, бронхолитиков).

III. Проба тест-уколом (прик-тест). В настоящее время прик-тест является самым распространенным тестом для проведения кожных проб. Этот тест проводится специальным устройством, в который вставлена игла, что позволяет стандартизовать глубину укола, исключает раздавливание капли при уколе. Капли аллергена и контролей наносятся на обработанную кожу предплечья так же, как и при проведении скарификационного теста. Результат тестирования замеряют через 15-20 мин, регистрируют в мм (измеряется наибольший диаметр папулы прозрачной линейкой). Положительной считается реакция при диаметре 5 мм и более, сомнительной – 3 мм, ги-перергичной – 15 мм и более.

IV. Внутрикожные пробы. Ставятся, главным образом, с инфекционными аллергенами (бактерий, грибов и др.). С неинфекционными аллергенами их проводят только тогда, когда аппликационные или скарификационные тесты отрицательны или сомнительны, а анамнез четко положительный.

Техника постановки: кожу сгибательной поверхности предплечья или на спине обрабатывают 70° спиртом, после чего туберкулиновым или инсулиновым шприцем вводят 0,05-0,1 мл инфекционного аллергена. Вводимый внутрикожно аллерген должен быть в 10 раз меньшей концентрации, чем при скарификационном тестировании. В качестве контроля вводят внутрикож-но тестконтрольную жидкость и скарификационно раствор гистамина. Результаты учитывают через 20 мин и 24-48 ч.

При проведении внутрикожных проб с неинфекционными аллергенами их вводят в объеме 0,02 мл. Внутрикожные пробы менее специфичны и довольно часто дают ложноположительные результаты; кроме того, они могут спровоцировать нежелательные осложнения, поэтому количество аллергенов при внутрикожном тестировании не должно превышать 4-5.

Четвертый этап – провокационные тесты – это достаточно достоверный метод диагностики, позволяющий достичь контакта шокового органа с аллергеном. Их используют в случае расхождения данных анамнеза и результатов кожного тестирования. В зависимости от вида аллергена и способа его введения в организм различают следующие провокационные тесты: назальный, конъюнктивальный ингаляционный, подъязычный, оральный. Противопоказания для их проведения те же, что и для кожного тестирования.

Назальный тест. Проводится с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми, бактериальными аллергенами для диагностики аллергического риносинусита, трахеита, бронхита, бронхиальной астмы в стадии ремиссии.

Ингаляционный тест. Применяется у больных с бронхиальной астмой. Основными показаниями для его проведения являются:

• выявление этиологически значимых аллергенов;
• оценка эффективности медикаментозного лечения;
• выявление неспецифических факторов, вызывающих бронхоспазм;
• определение профессиональной пригодности пациента (выявление латентного бронхоспазма).

Проводится тест с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми, бактериальными аллергенами с А-5-летнего возраста при отрицательном результате назального теста или же несовпадении данных анамнеза с результатами кожного тестирования.

Исследования проводят в фазе ремиссии в стационаре. Перед постановкой теста проводят спирографию – записывают на спирограмме характер кривой форсированной (Ф) ЖЕЛ и вычисляют ее величину за первую секунду – ФЖЕЛ,. Вычисляют также коэффициент Тиффно (отношение ФЖЕЛ к ЖЕЛ), %. У здоровых людей он составляет 70- 80%. Затем больной вдыхает через ингалятор раствор аллергена (сначала контрольный раствор), начиная с дозы минимальной концентрации, до той, которая даст заметную реакцию. Каждый раз записывают спирограм-му. Если ФЖЕЛ, и коэффициент Тиффно снижаются на 20%, проба считается положительной.

Подъязычный тест. Используется для диагностики пищевой и лекарственной аллергии. аллерген наносится на слизистую оболочку подъязычной области. При пищевой аллергии применяются натуральные продукты в разведении 1:10, при лекарственной – 1/8- 1/4 разовой дозы растворенного вещества. Тест считается положительным при появлении в подъязычной области гиперемии, отека, зуда, а также учащении пульса, высыпаниях на коже, чихании, кашле.

Элиминационный тест. Применяется для диагностики пищевой аллергии. В качестве аллергенов используют натуральные продукты. За 2-3 дня до проведения теста из рациона пациента исключают исследуемый продукт. Затем снова вводят этот продукт в рацион, оценивая общее состояние и состояние шокового органа.

Проба считается положительной при появлении реакции со стороны шокового органа в течение часа.

Лейкоцитопенический тест. Используется при пищевой, иногда, при лекарственной аллергии. В условиях элиминационной диеты (натощак или голодание) дважды в течение 1 ч определяют количество лейкоцитов в крови. Затем вводят аллерген, после чего через 30, 60 и 90 мин подсчитывают количество лейкоцитов. Если количество лейкоцитов снижается более чем на 1*109 в 1 л, тест считается положительным.

Провокационные тесты с аллергенами (особенно ингаляционные) могут применяться лишь в особо сложных диагностических случаях, при полной готовности к возможному развитию анафилактических осложнений, о возможном развитии которых больной должен быть уведомлен.

Пятый этап – иммуно-лабораторное обследование.В настоящее время иммуно-лабораторные методы диагностики применяются довольно широко, так как они обладают рядом преимуществ:

1. Возможностью проведения исследования в раннем детском возрасте (до 2-3 лет);
2. Возможностью проведения исследования в период обострения аллергического заболевания и у пациентов с высокой степенью сенсибилизации;
3. Выявлением поливалентной сенсибилизации, когда нет возможности провести тестирование in vivo сразу со всеми предполагаемыми аллергенами, а сроки обследования ограничены;
4. Возможностью исследования при измененной реактивности кожи (ложноположитель-ный или ложноотрицательный результат при кожном тестировании);
5. Безопасностью для больного, так как не вызывают дополнительной сенсибилизации;
6. Обследованием одновременно с большим количеством лекарственных препаратов, другими химическими веществами.

С этой целью применяются:

• Радиоаллергосорбентный тест (PACT) для определения специфических IgE-антител к различным аллергенам;
• Метод ПРИСТ для определения концентрации общего IgE;
• Тест Шелли;
• Тест дегрануляции тканевых базофилов;
• Реакция лейкоцитолиза;
• Тест повреждения нейтрофилов;
• Реакция торможения миграции лейкоцитов;
• Реакция бластной трансформации лимфоцитов;
• Метод ИФА для определения специфического IgE.

Из неспецифических методов исследования применяют определение:

• концентрации гистамина и гистаминазы;
• гистаминопексической активности сыворотки крови.

К современным методам исследования относится метод определения уровня триптазы – специфического протеолитического фермента тканевых базофилов, который выделяется при дегрануляции последних.

Если возникает необходимость оценить иммунный статус больного, тогда используются все возможные методы иммуно-лабораторного обследования для определения количества и функции популяций и субпопуляций Т- и В-лимфоцитов, концентрации иммунных комплексов, уровня иммуноглобулинов, функции моноцитов/макрофагов, нейтрофилов, естественных киллеров и т. п.

Общие положения

Замечание 1

Диагностику необходимо проводить с целью выяснения факторов и причин, способствующих возникновению аллергических заболеваний.

Для диагностики аллергических заболеваний применяются следующие методы обследования:

• специфические;
• неспецифические.

Клинические методы обследования и исследования включают:

• сбор анамнеза;
• врачебный осмотр;
• инструментальные методы;
• клинико-лабораторные методы;
• функциональные методы и др.

Основу специфической диагностики составляет выявление аллергена. С этой целью определяют:

• специфические $IgE$ – аллергические антител а;
• сенсибилизированные лимфоциты;
• продукты специфического взаимодействия антител и антигенов.

Сбор аллергологического анамнеза

Во время опроса особенно обращают внимание на:

• семейный анамнез аллергии;
• особенности появления первых симптомов заболевания;
• динамику развития симптомов;
• интенсивность проявления;
• длительность и чувствительность к медицинским препаратам;
• сезонность заболевания;
• связь с острыми респираторными вирусными или бактериальными инфекционными заболеваниями;
• связь заболевания с изменением жилищных, климатических, рабочих условий;
• жилищно-бытовые условия (наличие ковров, мягкой мебели, домашних животных, птиц, рыб, книг и др.).

Отдельно собирают:

• фармакологический анамнез (развитие аллергической реакции в зависимости от приема медицинского препарата, ее продолжительность, объем предоставленного лечения и его эффективность);
• пищевой анамнез (развитие аллергической реакции в зависимости от употребления определенного продукта – мед, яйца, рыба, некоторые фрукты и овощи и др.).

Кожные тесты

Существуют разнообразные методы кожного тестирования с аллергенами:

• рrick-тесты;
• скарификационные тесты;
• внутрикожные тесты;
• аппликационные тесты.

С ингаляционными и пищевыми аллергенами кожное тестирование проводят с целью диагностики исключительно $IgE$-зависимых аллергических заболеваний.

При кожном тестировании применяют стандартные серийные водно-солевые экстракты аллергенов. Их приготавливают из:

• домашней пыли,
• пыльцы растений,
• шерсти,
• клещей домашней пыли,
• пуха,
• пищевых продуктов,
• эпидермиса птиц и животных и др.

Противопоказаниями для проведения тестов являются:

• беременность и период лактации;
• острые интеркуррентные инфекции;
• заболевания в период обострения (ревматизм и туберкулез, нервные и психические заболевания);
• болезни сердца, системы крови, печени и почек в стадии декомпенсации;
• анафилактический шок в анамнезе.

При расхождении данных кожного тестирования и анамнеза используют провокационные тесты.

Провокационные тесты делят в зависимости от вида аллергена и способа его попадания в организм на:

• назальный;
• конъюнктивальный;
• подъязычный;
• ингаляционный;
• пероральный.

Методы лабораторной диагностики

Показаниями для назначения методов специфической лабораторной аллергодиагностики служат:

• ранний детский возраст;
• противопоказание к проведению кожного тестирования;
• высокий уровень сенсибилизации пациента;
• рецидивирующее течение заболевания без периодов ремиссии;
• невозможность отмены препаратов, влияющих на кожную чувствительность;
• измененная реактивность кожи;
• поливалентная сенсибилизация;
• ложнопозитивный или ложнонегативный результат при кожном тестировании;
• уртикарный дермографизм.

В настоящее время в клинической практике применяют следующие методы специфической лабораторной аллергодиагностики:

• радиоаллергосорбентный тест для выявления специфических $IgE$;
• иммуноферментные методы анализа для выявления специфических $IgE$ с флюориметрическим, колориметрическим, хемилюминесцентным способом регистрации результатов;
• прямой базофильный тест;
• непрямой базофильный тест;
• реакция специфического высвобождения гистамина из базофилов периферической крови пациента.

Эффективность терапии и профилактики во многом определяется качеством диагностических мероприятий, направленных на выявление причин и факторов, способствующих возникновению, формированию и прогрессированию аллергических заболеваний.

Методы диагностики аллергических заболеваний включают:

1. Сбор аллергоанамнеза (анамнеза болезни и жизни пациента).

2. Объективное обследование больного.

3. Данные инструментальных методов обследования (рентген, спирометрия, эндоскопия и т. д.).

4. Данные аллергологического тестирования in vivo.

5. Данные лабораторных исследований.in vitro

6. Данные эффективности назначенной терапии.

Аллергодиагностика решает следующие задачи:

ü Дифференциальная диагностика ряда заболеваний:

o атопических заболеваний кожи,

o аллергического ринита, конъюнктивита,

o эндогенной и экзогенной бронхиальной астмы,

o аллергического бронхолегочного аспергиллеза,

o заболеваний легких с астматическим компонентом в сочетании с системными

заболеваниями,

o иммунодефицитов, миеломной болезни.

ü Диагностика пищевой аллергии.

ü Диагностика лекарственной аллергии.

ü Выявление причинного аллергена.

ü Дифференцирование аллергических состояний от симптоматически сходных заболеваний – пищевой непереносимости, др. видов гиперчувствительности, псевдоаллергических и анафилактоидных реакций.

ü Прогноз тяжести аллергического заболевания.

ü Подбор аллергенов для специфической иммунотерапии.

ü Мониторинг и контроль результатов терапии и элиминационных мероприятий.

Методы аллергодиагностики можно разделить на in vivo (инвазивные) и in vitro (неинвазивные).

К методам in vivo относятся :

1)различные виды кожных проб (прик-тесты, скарификационные, и внутрикожные пробы с разными (стандартными наборами аллергенов ).

При проведении тестов на кожу наносятся или в/кожно вводятся аллергены. По реакции на них (покраснение, появление аллергической реакции в месте нанесения/введения аллергена) судят о наличии аллергии

n внутрикожные пробы - применяются для выявления сенсибилизации к аллергенам бактериального и грибкового происхождения; для определения степени чувствительности к аллергенам неинфекционной природы;

n прик-тест - применяют для диагостики реагинового типа аллергических реакций, например, пищевой, лекарственной, пыльцевой аллергии.

n Patch-тесты чаще всего используют для выявления сенсибилизации на косметические средства и металлы

n В России благодаря невысокой стоимости и доступности определения, до настоящего времени наиболее распространенным является скарификационный тест.

n Аппликационные пробы - растворы стандартизованных аллергенов наносят на специальный аппликатор (пластырь).

Тесты выполняют на коже спины, предплечья.

Результаты учитывают через 20–30 мин

Реакция оценивается следующим образом:

в виде эритемы и отека - +, в виде папул - ++, с наличием волдыря- +++.

Положительный результат свидетельствует о наличии сенсибилизации организма к тому или иному аллергену. Степень выраженности реакций коррелирует с активностью патологического процесса и тяжестью течения заболевания.

Применяют для выявления аллергических реакций на пищевые, ингаляционные и др. аллергены, используются для диагностики контактной сенсибилизации на лекарственные препараты, химические аллергены, ионы металлов

Пример: Скарификационные пробы

Внутрикожные пробы

n классические- способ введения аллергена внутрь кожи.

В основе- локальная ответная реакция на введение аллергена сенсибилизированному индивидууму, которая может развиваться по немедленному и замедленному типу реакций гиперчувствительности.

Результаты реакции :

n ГНТ регистрируют через 20–30 мин

n ГЗТ - через 48–72 ч.

Применяется для :

n диагностики ГЗТ

n для выявления дефицитов Т-клеточного звена

n Внутрикожная проба ставится путем инъекции в эпидермис 0,1 мл раствора аллергена

n Типичным примером является проба Манту.

Пример:Прик-тесты - способ проведения внутрикожных проб для диагностики ГНТ.

Специальную металлическую или пластиковую иглу с ограничителем погружают в раствор аллергена и прокалывают кожу на глубину 1мм.

В качестве (+)- контроля используют 10% р-р гистамина, а (-)- растворитель.

Результат учитывают через 15–20 мин измеряя диаметр папулы в двух направлениях.

При проведении скрининга или диагностики в случае отсутствия явных указаний на определенный аллерген приходится ставить прик-тесты на несколько аллергенов.

Для упрощения и стандартизации процедуры применяют мультитестовый аппликатор - одноразовое устройство для одномоментной постановки кожных проб с аллергенами

Оценка кожных проб

n Результат кожных реакций немедленного типа учитывают через 15–20 мин.

Он может быть:

n а) отрицательным - аналогичен контрольному;

n б) сомнительным (±) - наличие только гиперемии (без волдыря);

n в)слабоположительным (+) - наличие волдыря размером 3 мм;

n г) положительным (++) - наличие четко выраженного волдыря (до 5 мм);

n д) резкоположительным (+++) - наличие волдыря величиной не более 10 мм (с гиперемией и псевдоподиями);

n е) очень резко положительным (++++) - наличие волдыря величиной свыше 10 мм (с гиперемией и псевдоподиями).

Существует ряд состояний, при которых кожные пробы не рекомендованы или противопоказаны:

· ранний возраст пациента (до 3-х лет кожные пробы запрещены),

· опасность возникновения анафилактического шока,

· рецидивирующий характер крапивницы,

· массовая пораженность кожи при тяжелом атопическом дерматите, выраженный дермографизм, ихтиоз,

· коллагенозы, васкулиты, туберкулез, тромбоцитопения,

· гематологические заболевания,

· обострение хронических аллергических заболеваний,

· психические заболевания, эпилепсия,

· риск сенсибилизации при необходимости тестировать большое количество аллергенов,

· отказ пациента от кожных проб;

неадекватны (во время лечения антигистаминными препаратами, бронхоспазмалитиками, бета-2-адренонеметиками, кортикостероидами при невозможности отменить курс лечения);

неспецифичны - ответ на консервант или стабилизаторы в препарате аллергена;

неинформативны - низкая специфичность ответа на пищевые аллергены (порядка 50 - 60%), аллергены домашней пыли, клещи; большая вероятность перекрестных реакций (особенно в сезон поллинации). Кожные тесты могут быть ложноположительными из-за присутствия в некоторых пищевых аллергенах веществ-гистаминлибераторов.

2)Аллергические провокационные пробы -

биологические пробы in vivo, позволяющие выявить у человека аллергию немедленного типа к определенному аллергену.

n Основаны на введении аллергена в орган-мишень.

n Являются более достоверными, чем кожные пробы

n используются в случае расхождения данных анамнеза и результатов кожного тестирования

2.1.Назальная проба (для диагностики аллергического ринита, сенной лихорадки, при сомнительных результатах кожного тестирования):

n на слизистую одной из половин носа наносят каплю физ.р-ра (-)- контроль. Если через 15 мин на ней не возникает реакция, то на слизистую второй половины носа наносят каплю аллергена в концентрации, давшей сомнительный результат при кожном тестировании.

Тест считается (+)- при развитии отека слизистой, ринореи, чихания.

2.2.Ингаляционная проба проводится при (-)- результатах кожных проб для диагностики профессиональной бронхиальной астмы на такие аллергены, как формальдегид, азотистый кобальт, бихромат калия, хлористый никель.

• Проба проводится на установке с замкнутым дыхательным контуром, которая создает небольшое избыточное давление на вдохе/выдохе.

Позволяет оценить степень и уровень спазма бронхолегочного дерева (для бронхиальной астмы характерен спазм мелких бронхов и бронхиол). Вначале проводят ингаляцию дист. водой (контроль), а затем - испытуемым аллергеном.

При появлении признаков бронхоспазма (система позволяет регистрировать их до развития симптомов астмы) аллерген выводится из дыхательной смеси, а больному оказывается необходимая помощь.

2.3.Сублингвальная проба используется для диагностики пищевой и лекарственной аллергии.

n Аллерген наносится на слизистую оболочку подъязычной области. При пищевой аллергии применяются натуральные продукты в разведении 1:10, при лекарственной - 1/8–1/4 разовой дозы растворенного вещества.

Тест считается (+)- при появлении в подъязычной области гиперемии, отека, зуда, а также при учащении пульса, чиханье, кашле.

2.4.Конъюнктивальная проба применяется для диагностики аллергического конъюнктивита и выявления аллергенов, вызывающих его развитие.

• в конъюнктивальный мешок, отодвинув нижнее веко, закапывают 1–2 капли тест-контрольной жидкости.

При отсутствии изменений конъюнктивы через 15–20 мин переходят к исследованию с аллергеном.

Аллерген (1–2 капли) закапывают в концентрации, которая дала слабоположительную кожную пробу.

При положительной реакции проявляются слезотечение, гиперемия конъюнктивы, зуд век.

Методы диагностики in vitro

n Диагностика аллергии по анализам крови - современное направление в аллергологии.

n В отличие от кожных проб и провокационных тестов анализы крови не приводят к развитию аллергических реакций у пациента, практически не имеют противопоказаний и рекомендуются при любой форме аллергии.

Основными показаниями являются:

n ранний детский возраст;

n высокая степень сенсибилизации пациентов;

n непрерывно рецидивирующее течение заболевания без периодов ремиссии;

n невозможность отмены антигистаминных и других препаратов;

n поливалентная сенсибилизация, когда отсутствует возможность проведения тестирования in vivo сразу со всеми предполагаемыми аллергенами в ограниченные сроки обследования;

n резко измененная реактивность кожи;

n ложноположительный или ложноотрицательный результат при кожном тестировании;

n уртикарный дермографизм.

Основными преимуществами методов специфической диагностики
in vitro являются :

n безопасность для больного;

n высокая стандартность и воспроизводимость;

n возможность количественного (цифрового) учета;

n возможность автоматизации;

n возможность проведения исследования в случае, когда пациент находится от аллерголога на большом расстоянии и доставлена лишь сыворотка больного;

n малое количество крови для исследования.

К методам диагностики in vitro можно отнести :

ü Определение общего IgE.

ü Определение аллерген-специфических IgE.

ü Определение аллерген-специфических IgG (суммарно или только изотипа G4).

ü Определение гистамина, сульфолейкотриенов и других медиаторов аллергических реакций, цитокинов и ферментов воспаления.

ü Оценку уровня экспрессии трансмембранных белков-маркеров активации иммунокомпетентных клеток методом проточной цитометрии.

ü Клеточные тесты и реакции (выявление различных субпопуляций лимфоцитов, участвующих в иммунном ответе, и оценка их функциональной активности).