Подготовить все необходимое для определения группы крови. Способы определения группы крови
Определение группы крови с помощью стандартных парных изогемагглютинирующих сывороток.
1Вступительное слово: Мы проводим определение группы крови со стандартными сыворотками в процедурном кабинете по назначению врача. На мне шапочка, очки, маска, халат, фартук, перчатки. Руки предварительно обработаны гигиеническим способом.
2 Оснащение:
Стандартные сыворотки двух серий
Исследуемая кровь в пробирке
Тарелка для определения группы крови.
Четыре стерильных стеклянных палочки (в стакане, чашке Петри)
Изотонический раствор хлорида натрия (пробирка)
Стерильные пипетки 2 шт.
Ёмкость с 3% раствором хлорамина.
3 Проведение манипуляции
Внести по капле (0,1 мл) стандартных сывороток в отдельные лунки.
Внести на тарелку большую каплю крови рядом с лункой 4й группы, на расстоянии не менее 1 см от нее.
Отдельными концами стеклянных палочек внести кровь в сыворотки (соотношение 10:1), смешать
Покачивать тарелку 5 мин, наблюдать агглютинацию.
В лунки, в которых произошла агглютинация добавить физиологический раствор (0,1 мл)
Покачивать тарелку, наблюдать агглютинацию.
Форма ответа:
При определении группы крови со стандартными сыворотками
Агглютинация не наблюдается ни в одной из лунок – первая группа
Агглютинация наблюдается в первой и третьей лунках – вторая группа
Агглютинация наблюдается в первой и второй лунках – третья группа
Агглютинация наблюдается во всех лунках – вероятно четвертая группа
Определяем результат с сывороткой четвертой группы (аналогично)
Форма ответа:
С сывороткой четвертой группы агглютинация не наблюдается – четвертая группа
С сывороткой четвертой группы агглютинация не наблюдается – определить группу крови невозможно, следует заменить сыворотки.
После проведения манипуляции все загрязненные кровью предметы замачиваем в трехпроцентном растворе хлорамина на один час.
4 Возможные ошибки:
Грубые ошибки:
Не использование средств защиты медработника.
Повторное использование палочек.
Перенос палочек, контактировавших с кровью над лотком с чистыми палочками.
Не соответствие картины агглютинации заключению о групповой принадлежности.
Не продезинфицированы предметы контактировавшие с кровью
Не грубые ошибки:
Время ожидания агглютинации менее 5 мин.
Не внесен физраствор в лунки, в которых произошла агглютинация.
Удерживание палочек за концы а не за центр.
5 Критерии оценивания:
Сдал – отсутствие грубых ошибок, наличие не более двух не грубых ошибок.
Не сдал – наличие грубых ошибок, наличие более двух не грубых ошибок.
При совершении грубой ошибки преподаватель может попросить повторить соответствующий этап манипуляции. Если ошибка повторяется – не сдал. Допускается не более одного повторения.
Каждому человеку полезно запомнить свою группу крови. Это может неожиданно пригодиться при чрезвычайных ситуациях. Не зря у военнослужащих отмечается группа крови на гимнастерке или жетонах. Проблемы с тем, как определить группу крови, не существует. В крупных лечебных учреждениях этим занимаются лаборатории. Но даже в небольших сельских амбулаториях имеются стандартные наборы для определения группы, а провести анализ умеют все врачи и средние медицинские работники. Самостоятельно делать это ни к чему, когда есть специалисты.
Какая группа крови у ребенка можно предположить по родителям. Например, зная, что у родителей вторая, третья или четвертая, не стоит надеяться, что у ребенка будет первая.
Подобные советы дают люди, которые «живут» в интернете и собирают любую информацию без разбора. Порой переиначивают ее на свой лад.
Действительно, имеется теория питания в зависимости от типа крови и проведены попытки связать с ней характер личности. Но это разрабатывалось для подбора наиболее подходящего рациона, предотвращения болезней. О связи типа личности с номером крови даже психологи перестали говорить.
Тем более, нельзя судить по любимым блюдам или наклонности к лидерству о своей группе.
В домашних условиях что-либо узнать лучше из полноценных статей, консультаций специалистов. Возможно, имеются медицинские документы (амбулаторная карта, выписки из стационара), в которых есть сведения о вашей крови.
По желанию доноров и пациентов стационаров в паспорт можно проставить печать с указанием этих сведений.
Подобные нашивки применяются на армейской форме
Кто придумал группы крови
Первооткрывателем четырех групп крови является австрийский ученый и врач К. Ландштейнер, получивший за это Нобелевскую премию по медицине в 1930 году. Открытие позволило предотвратить смертельные исходы по причине переливания, изучать предварительно совместимость донорских признаков и реципиента.
Суть предложенной системы АВ0 заключается в наличии у человека и животных антигенных структур на эритроцитах. Типовых антител (гаммаглобулинов) к ним в плазме не имеется. Поэтому реакцию «антиген + антитело» можно использовать для определения.
Распространенность групп крови по национальному признаку
Склеивание эритроцитов происходит во время встречи антигена со своим антителом. Такая реакция называется гемагглютинацией. Она видна при проведении анализа в виде мелких хлопьев. Определение группы крови основывается на получении картины агглютинации с типовыми сыворотками.
Антигены эритроцитов типа «А» связываются с антителами «ά», соответственно «В» с «β». По составу крови выделены:
- I, или 0 (ά, β) - на поверхности эритроцитов совсем нет антигенов;
- II, или А (β) - содержат антиген А с антителом β;
- III, или В (ά) - имеется антиген типа В с антителом ά;
- IV, или АВ(00) - имеет оба антигена, но не содержит антител.
Антигены имеются у зародыша человека уже в эмбриональном периоде, а антитела (агглютинины) появляются в сыворотке новорожденных в течение первого месяца жизни.
Стандартное определение группы крови (простой метод)
Для проведения анализа на группу крови нужны эритроциты пациента (берутся из капли крови) и стандартные сыворотки, содержащие известные антигены.
Сыворотки изготавливаются из донорской крови на «Станциях переливания», имеют сроки годности, требуют соблюдения условий хранения. На ампулах указывается номер серии. Для точного анализа берется два набора сывороток разных серий. Это делается с целью исключения ошибок.
На плоской тарелке двумя рядами помещают по крупной капле четырех сывороток (достаточно только III и II, но для контроля берется еще 1 и 1V). Разными стеклянными палочками (удобно пользоваться глазными пипетками) в капли сывороток вносят исследуемую кровь (соотношение должно получиться примерно 1:10) и осторожно помешивают.
Пять минут тарелку покачивают, давая возможность сывороткам хорошо перемешаться с кровью.
Расшифровка результатов
Проходит 5 минут, и можно оценивать результаты анализа. В больших каплях сыворотки наступает просветление, в одних образуются мелкие хлопья (реакция агглютинации), в других их нет. Здесь возможны варианты:
- если агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками III и II групп (+ контрольные 1 и 1V) - это первая группа;
- если свертывание отмечается во всех, кроме II - это указывает на вторую группу;
- при отсутствии агглютинации только с III сывороткой - устанавливается третья группа крови;
- если свертываемость отмечается во всех пробах, включая 1V-контрольную - группа четвертая.
Когда сыворотки расположены в правильном порядке, на тарелке проставлены подписи, то ориентироваться легко: где нет агглютинации, такая и группа.
Бывают случаи, когда склеивание видно неясно. Тогда анализ переделывают, мелкую агглютинацию смотрят под микроскопом.
Метод перекрестной реакции
Для уточнения группы при невыраженной агглютинации применяют метод двойной перекрестной реакции со стандартными эритроцитами. В данном случае известными являются не сыворотки, как в простом методе, а эритроциты. У пациента кровь набирают в пробирку, центрифугируют и для исследования пипеткой откачивают сверху сыворотку.
Стандартные антисыворотки
На плоскую белую тарелку капают 2 большие капли сыворотки от пациента. В них добавляются стандартные эритроциты А (II) и В (III) групп крови. Постепенно размешивают, покачивают тарелку.
Результат оценивается через 5 минут:
- если агглютинация наступила в обеих каплях, группа первая;
- если нет ни в одной пробе, группа четвертая;
- если в одной из примененных известных эритроцитов, то группа определяется по наличию или отсутствию свертываемости в капле.
Определение группы цоликлонами
Цоликлоны - это синтетические заменители сывороток. Они содержат искусственные заменители агглютининов ά и β. Их называют эритротестами «Цоликлон анти-А» (розового цвета) и «анти-В» (синего). Ожидаемая агглютинация происходит между эритроцитами исследуемой крови и агглютининами цоликлонов.
Методика не требует использования двух серий, считается более точной и надежной. Проведение и оценка результатов такие же, как в простом стандартном методе.
Особенность:
четвертая группа АВ(IV) обязательно подтверждается реакцией агглютинации со специфическим цоликлоном «анти-АВ» и отсутствием неспецифического склеивания эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия.
Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»
Метод позволяет определить группу и резус фактор в лаборатории и полевых условиях. В состав набора входит карточка с лунками. На дно лунок уже нанесены высушенные реагенты. Здесь, кроме «анти-А», «анти-В» и «анти-АВ» используется «анти-D», который дает результат резус-фактора.
Можно использовать кровь в любом виде, подойдет соединение с консервантом и взятая из пальца.
Перед исследованием на карточке записывается фамилия пациента, в каждую лунку вносится капля воды для растворения ингредиентов. Затем отдельными палочками в лунки с реактивами добавляют кровь и слегка перемешивают. Окончательный результат «читают» спустя три минуты.
Группа крови всегда перепроверяется при необходимости переливания. Одновременно контролируют групповую и индивидуальную совместимость. Ведь, на самом деле, в крови человека обнаружено гораздо больше антигенных свойств, чем в системе АВ0. Просто они у большинства населения слабо проявляются.
Но у пациента с тяжелыми заболеваниями, изменяющими свойства крови и аллергизирующими организм, они становятся определяющими, требуют считаться с наличием и уровнем в крови. Поэтому знание пациентом собственной группы добавляет уверенности в результате исследования.
Определение группы крови по стандартным сывороткам используется часто (по сравнению с другими методиками). В основе данной техники — содержащиеся в крови агглютинины и агглютиногены в различных комбинациях.
Соединение одноименных агглютиногена и агглютинина сопровождается реакцией агглютинации (однородное пятно распадается на многочисленные мелкие пятна, состоящие из эритроцитов, склеившихся между собой).
Суть метода
При оказании медицинской помощи не всегда удается быстро остановить кровотечение, для переливания требуется определение группы крови, резус-фактора.
Существуют 2 эритроцитных антигена (агглютиногены А и В) и 2 антитела (а и b). Различные комбинации антигенов и антител образуют 4 группы крови.
Данный способ имеет преимущества, т. к. позволяет свести к одному многочисленные измерения.
Методика определения показателей
Определение групп крови по стандартным сывороткам проводится с использованием реактивов, содержащих агглютинины разных групп, вступающих в реакцию с агглютиногенами, находящимися на поверхности эритроцитов.
Чтобы выявить группу крови, достаточно воспользоваться стандартными сыворотками лишь II и III групп. Однако для исключения возможных ошибок с целью дополнительного контроля используют и остальные (I и IV групп).
Изготовление сыворотки
Стандартные сыворотки для определения группы крови получают из донорской крови. С этой целью используют специальную систему: выделяют плазму вместе с находящимися в ней антителами, затем ее разводят изотоническим раствором хлорида натрия.
Помещают 1 мл раствора NaCl 0,9% в пробирку, добавляют плазму (1 мл), взбалтывают состав. Берут 1 мл полученной смеси, переносят в другую пробирку с изотоническим раствором.
Манипуляцию повторяют, пока не получат разведение смеси в пропорции 1:256. Другие разведения не используют, чтобы исключить возникновение ошибки.
Для одного исследования с помощью стандартных сывороток их требуется 3 (2 серий для каждой группы), отличающихся по цвету:
- I (0) — прозрачная жидкость, флакон снабжен белой этикеткой;
- II (А) — жидкость голубая, флакон с 2 полосами синего цвета;
- III (В) — бледно-розовая жидкость, флакон с 3 розовыми полосками;
- IV(АВ) — желтая жидкость, на этикетке флакона 4 желтые полоски.
На этикетках указаны:
- титр;
- срок годности;
- дата выпуска;
- серийный номер.
- данные об изготовителе.
Проведение исследования
Температура в помещении должна быть в пределах +15…+ 25°С, требуется хорошее освещение.
Используют специальный планшет, имеющий области с пометками. На него наносят каждую сыворотку (берут 2 образца, 1 из них — контрольный, 2 — для диагностики).
Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают каплю крови, смешивая с каждым в отдельности реагирующим раствором. Спустя несколько минут (5-6) анализируют полученные данные:
- если происходит реакция агглютинации — сывороточный тест считается положительным;
- при отсутствии агглютинации тест отрицательный.
Результаты исследования
В случае положительного результата эритроциты склеиваются (в реагирующем растворе образуются красные сгустки).
Если цвет раствора не изменился, реакция считается отрицательной. Есть закономерности, зависящие от комбинаций отрицательных и положительных реакций, происходящих в растворах:
- I(0), если ни в одном образце нет положительной реакции;
- II (А), если в образце II (А) состояние не изменилось, а в 2 остальных оказалась положительная реакция;
- III(В), если только в образце III(В) реакция оказалась отрицательной;
- IV(АВ), если в каждом из 3 образцов реакция оказалась положительной.
Появление других комбинаций связано с погрешностями, возникающими при исследовании.
Использование старых реактивов или неправильное проведение анализа может сопровождаться слабой реакцией. В таких случаях с целью уточнения необходимо сделать тесты с использованием других методик.
Вконтакте
В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность. Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.
Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции. Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур. Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.
Состав крови различных групп крови
Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».
Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.
Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.
Выделяются следующие группы крови по составу:
- I (0) – ά, β - поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
- II (А) – β - на поверхности имеется антиген А и антитело β;
- III (В) – ά - поверхность содержит В с антителом типа ά;
- IV (АВ) – 00 - поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.
Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.
Методы определения
Стандартный метод
Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.
Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.
Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.
Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система - посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.
Разведение производится так:
Непосредственно исследование проводится таким образом:
- На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
- Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.
Правила расшифровки результатов
Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.
Видео: Определение группы крови и резус-фактора
Здесь возможны варианты:
- Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) - определение первой группы;
- Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II - определение второй;
- При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы - определение III;
- Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной - определение IV.
Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.
В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.
Метод перекрестной реакции
Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.
Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.
На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов.
Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.
Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.
Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:
| Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками | Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами | Группы крови | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 0(I) | A(II) | B(III) | AB(IV) | 0(I) | A(II) | B(III) | |
| – | – | – | - | – | + | + | 0(I) |
| + | – | + | - | – | – | + | A(II) |
| + | + | – | - | – | + | – | B(III) |
| + | + | + | – | – | – | – | AB(IV) |
Агглютинация;
– агглютинация отсутствует;
— реакцию не проводят.
Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.
Определение группы крови цоликлонами
Цоликлоны - синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.
Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.
| Вид цоликлонов | Группа крови | ||
|---|---|---|---|
| Результат агглютинации | Анти-А | Анти-В | |
| - | - | 0(I) | |
| + | - | A(II) | |
| - | + | B(III) | |
| + | + | AB(IV) |
IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.
Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»
Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.
При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:
- Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0;
- Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования;
- Стеклянные палочки для перемешивания образцов;
- Чистая пипетка для набора растворов.
Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.
Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.
В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.
Видео: Определения групп крови с помощью цоликлонов
В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность. Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.
Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции. Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур. Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.
Состав крови различных групп крови
Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».
Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.
Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.
Выделяются следующие группы крови по составу:
- I (0) – ά, β - поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
- II (А) – β - на поверхности имеется антиген А и антитело β;
- III (В) – ά - поверхность содержит В с антителом типа ά;
- IV (АВ) – 00 - поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.
Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.
Методы определения
Стандартный метод
Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.
Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.
Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.
Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система - посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.
Разведение производится так:
Непосредственно исследование проводится таким образом:
- На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
- Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.
Правила расшифровки результатов
Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.
Видео: Определение группы крови и резус-фактора
Здесь возможны варианты:
- Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) - определение первой группы;
- Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II - определение второй;
- При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы - определение III;
- Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной - определение IV.
Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.
В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.
Метод перекрестной реакции
Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.
Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.
На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов.
Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.
Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.
Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:
| Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками | Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами | Группы крови | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 0(I) | A(II) | B(III) | AB(IV) | 0(I) | A(II) | B(III) | |
| – | – | – | - | – | + | + | 0(I) |
| + | – | + | - | – | – | + | A(II) |
| + | + | – | - | – | + | – | B(III) |
| + | + | + | – | – | – | – | AB(IV) |
Агглютинация;
– агглютинация отсутствует;
— реакцию не проводят.
Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.
Определение группы крови цоликлонами
Цоликлоны - синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.
Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.
| Вид цоликлонов | Группа крови | ||
|---|---|---|---|
| Результат агглютинации | Анти-А | Анти-В | |
| - | - | 0(I) | |
| + | - | A(II) | |
| - | + | B(III) | |
| + | + | AB(IV) |
IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.
Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»
Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.
При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:
- Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0;
- Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования;
- Стеклянные палочки для перемешивания образцов;
- Чистая пипетка для набора растворов.
Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.
Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.
В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.
Видео: Определения групп крови с помощью цоликлонов